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【培育基质控】培育基的高压灭菌及作用验证

发布日期:2022-05-30 16:12:49 作者:乐虎直播NBA 点击:40

  消毒灭菌在医学实践上有着重要意义。它可堵截传达途径、操控感染分散形成的损害;也可杀灭物品或器皿上的细菌,避免医院感染;在微生物查验的领域中,消毒灭菌是保正感染的病原学查验不受外来微生物污染的条件。

  (1)灭菌:是用恰当的物理或化学手法将物品中活的微生物杀灭或除掉的办法。本法适用于制剂、质料、辅料及医疗器械等物品的灭菌。(如外科器械、注射器、根底培育基灭菌等。)

  (2)消毒:是损坏物体上活的病原微生物的办法,但不包含细菌芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、新洁尔灭液擦拭查看台等。用于消毒的化学物品称消毒剂( dis-infectant)。一般来说,消毒对象是指物体而不是机体。

  (3)防腐:直接运用防腐剂(antiseptics)损坏或按捺活的病原微牛物的办法。如外科手术前碘液擦拭皮肤、双氧水清创创伤或灭菌番笕清冼双手等。

  (4)无菌:避免感染病原体进入灭菌安排或物品的操作技能称无菌操作。无菌即为不存在活的微生物。

  用于消毒灭菌的物理办法有热力、电离辐射、超声波、过滤等。这儿介绍热力消毒灭菌法。高热损坏微生物蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜,然后导致微生物逝世。受高热作用后,蛋白质分子运动加速,肽链衔接键开裂,蛋白变性凝结;细胞膜功用受损使胞内物质漏出,细菌表里环境平衡失调。

  不同品种微生物对热的耐受力不同,大都无芽胞细菌经55-60℃作用30-60分钟后逝世,100℃时敏捷逝世。有芽胞细菌则对高温有强的抵抗力,如肉毒芽胞梭菌煮沸需3—5小时才逝世。

  热力灭菌分干热灭菌法和湿热灭菌法两大类,相同温度下后者较前告效能大,其原因是:①湿热环境中菌体蛋白易凝结;②湿热穿透力比干热大;③湿热蒸气变为液态时可开释潜热,敏捷进步被灭菌物体的温度。

  (3)干烤。在干烤箱内进行,加热至150-180℃ 2-4小时到达灭菌作用,适用于高温下不蜕变、不被损坏和不蒸腾的物品,如玻璃器皿、瓷器,不能用于塑料、棉、纸制品。

  (1)巴氏消毒法。巴氏消毒法(pasteurization)是用较低温度杀灭液体中的病原微生物或特定微生物而坚持物品中所需的不耐热成分的办法。此法由巴斯德创建,用于酒类消毒而得名。现在用于牛乳消毒。办法有两种:一种为71.6℃加热15秒,另一种为63-66℃加热30分钟。大多选用榜首种办法。

  (2)煮沸法。在1个大气压下,水煮沸后温度达100℃,煮沸5分钟后可杀死一般细菌繁衍体。如于水中参加2%碳酸钠,可将其沸点进步至105℃,既可促进芽胞的杀灭,又可避免金属器皿生锈。

  (3)流转蒸气消毒法。又称常压蒸气消毒法,常用附诺(Amold)流转蒸气灭菌器,运用1个大气压下100℃水蒸气进行消毒,10-30分钟后细菌繁衍体被杀死,但对芽孢作用不大。

  (4)间歇灭菌法(fractional sterilization)。选用间歇办法到达灭菌意图。将灭菌物品置于阿诺流转蒸气灭菌器内,100℃加热15-30分钟,每日1次,接连3次。每次灭菌后取出物品置37℃孵育箱过夜,致残存的芽胞发育成繁衍体,次日再经过流转蒸气灭菌器加热而被杀灭。如此重复,既可杀灭芽胞,又可使不耐高温的物质免受影响。若某些物质不耐100摄氏度,则可将温度下降至75-80℃,每次加热时刻延长到30-60分钟,常用血清凝结器对吕氏血清培育基和L-J培育基的灭菌属此办法。

  (5)高压蒸气火菌法。运用密闭的耐高压蒸气灭菌器(autoclave),在蒸气不外溢的条件下,使锅内压力增高,随之蒸气温度也增高。通常在103.4kPa压力下蒸气温度到达121.3℃,保持15-20分钟,可杀灭一切的繁衍体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的灭菌,如一般培育基、生理盐水、手术敷料等。

  高压蒸气灭菌器使物品灭菌后到达无菌要求,这是药品试验中的根本确保。高压灭菌器灭菌作用是否合格足试验胜败的最根底最要害的首要过程。除少数培育基只需加热溶解,不需高压灭菌外,大部分培育基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培育基灭菌不完全,直接关系到对药品的无菌试验成果。因而有必要认真对高压灭菌器进行灭菌作用的验证。为此咱们供给了进行灭菌作用验证的一个简易可行的办法。

  将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片(以下简称菌片)用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各预备5-10份。别离放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中心5处。如灭菌器为二层,则需放10处。

  留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前,需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存l℃之间,则阐明灭菌器内的温度散布是均匀的。

  灭菌后的菌片应在严厉无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培育基内56-60℃培育24-48小时,调查色彩改动。如培育基变为黄色,阐明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌没有完全灭活,细菌仍可在培育基中成长,分化葡萄糖产酸变为黄色。如培育基色彩不改动仍为紫色,则阐明芽胞已灭活。一起要用未经灭菌的纸片放入培育基内作为阳性对照,不加纸片的空白培育基作为阴性对照。

  化学指示卡上的指示色块,在高压蒸气灭菌时,由淡黄色变为黑色。跟着色彩改动的深浅,并与对照色比较,可判别灭菌作用是否到达要求。化学指示卡应在枯燥处保存。遇潮会变色,影响灭菌作用的观测。

  高压蒸气灭菌有必要使蒸气顺畅进入灭菌器内,与灭菌物品触摸,并将原有的冷空气排出方可到达灭菌的作用。要进行空载热散布和满载热穿透力验证(满载时不超越总体积的2/3)。二种验证各重复三次,共做六次。

  5个点六次试验标明温度均在121℃,化学指示卡变黑;程度与对照色共同;培育基均未改动色彩,阐明高压蒸气灭菌作用合格。

  高压灭菌器归于强检仪器,但强检仅仅对仪器物理参数的查核。所以做过强检的灭菌器还有必要进行灭菌作用的验证。一些单位常常疏忽了这个重要的问题。国内市售的手提灭菌器,往往仪器指针到达所需的温度,但灭菌物品的实践温度却未到达要求。导致灭菌物品不完全,影响试验成果。培育基灭菌不完全,影响培育基的运用及成果判别。因而高压蒸气灭菌器无菌作用的验证是一个有必要引起注重的问题。

  运用高压蒸气灭菌器时,首先应注意在敞开蒸气的一起,扫除灭菌器内的冷空气。有必要将器内冷空气悉数扫除后,才可封闭排气孔。假设灭菌器内仍存留有部分空气时,刚压力表上虽已到达了某一压力值,但器内之温度仍未到达相应之度数。存留的空气越多,刚二者相差也越大。差也越大,器内温度缺乏,灭菌则不完全。

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